FICOLL PLUS 不連續密度梯度分離液使用說明
技術文檔編號：TBD0054SOP
ICLL PLUS不連續密度梯度分離液與梯度制備稀釋液配比稀釋后，可形成不同濃度（密度）梯度分離液，經低速（200-1000g）離心于數分至數十分鐘內可達到滿意的細胞分離效果。FICOLL PLUS 不連續密度梯度分離液不穿透細胞，無毒害，成功的用于動物細胞的分離。
試劑組成
名稱：FICOLL PLUS 密度梯度原液 貨號：P1114 100ml 梯度制備稀釋液 100ml
【簡介】
FICOLL PLUS 不連續密度梯度分離液與梯度制備稀釋液配比稀釋后，可形成不同濃度（密度）梯度分離液，經低速（200-1000g）離心于數分至數十分鐘內可達到滿意的細胞分離效果。FICOLL PLUS 不連續密度梯度分離液不穿透細胞，無毒害，成功的用于動物細胞的分離。
【操作方法】
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不同濃度（密度）分離溶液的制備，使用梯度制備稀釋液參考下表將原液稀釋至所需濃度：
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原液濃度（%）
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80
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67
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56
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45
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32
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20
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比重（g/ml）
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1.090
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1.077
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1.067
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1.056
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1.043
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1.031
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梯度分離層的制備：將梯度分離液由高密度至低密度逐層加入至離心管內，加入后應可見明顯的梯度界面。
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上樣：根據不同目的細胞，加入不同體積血液樣品或單細胞懸液（樣本體積及細胞濃度不宜過高，否則影響細胞的分離及回收）。
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離心：400-600g 離心 20-30min。根據不同樣本個體差異及目的細胞特點，用戶可適當調節離心力及離心時間（離心力*大不超過 1000g）。
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取樣：當所要分離的細胞絕大部分在兩層的界面時，可逐層去除分離溶液后收集界面部位的細胞;有時大部分細胞位于分離液層中,則需要逐層收集。收獲含有分離液的細胞經 2 次洗滌后可供培養或檢測用。
【注意事項】
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實驗全過程需在 20℃±2℃下進行，否則影響離心效果。
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由于多層分離溶液之間密度差別不大，因此離心機加速、降速時要慢，要平穩。
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試劑瓶蓋需蓋緊，防止蒸發和污染。
【儲存條件及有效期】常溫保存，有效期 2 年。本品易感染**，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟封后置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現白色結晶，影響分離效果。
【特殊細胞分離試劑盒舉例】
1. 富含 NK 活性大顆粒**細胞(LGL)的純化試劑盒（產品貨號：NK2011H）
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**母細胞純化和死細胞去除試劑盒（產品貨號：P1114B）
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【人不同血細胞的漂浮密度】
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細胞
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漂浮密度
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細胞
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漂浮密度
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紅細胞
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1.090-1.110
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**細胞
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1.052-1.077
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粒細胞
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B **細胞
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1.062-1.075
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嗜酸性
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1.090-1.095
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T **細胞
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1.065-1.077
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嗜中性
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1.080-1.085
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**母細胞
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1.065-1.077
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單核細胞
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1.050-1.066
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自然殺傷細胞
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1.050-1.070
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血小板
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1.030-1.060
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